chip-seq
Chip-seq
是一种研究蛋白质和
DNA
互作的方法,通过染色质免疫共沉淀技术(
Chip
)和高通量测序技术
(NGS)
结合在全基因组范围对
DNA
互作蛋白的结合位点进行高效而准确的筛选与鉴定。
利用特异性抗体通过免疫沉淀将目的蛋白以及结合的
DNA
捕获,对分离后的
DNA
进行建库测序,比对以及
peak calling
可得到目的蛋白全基因组范围内的结合位点,多样本比较可获得差异
peak
位点,对差异
peak
相关基因进行功能分析。
信息分析内容:
1.
原始数据质控
2.
与参考基因组序列的比对
3. Peak Calling
(统计每个样品的
Peak
片段信息)
4.
峰值分布分析
4. Peak
基因注释与富集分析
5. Motif
预测、基因集分析
7.
样品间差异
Peak
分析
8.
差异
Peak
功能分析
标准分析
10
个自然日
样品要求
样品类型:
DNA
样品;
总量:
≥
50 ng ChIPed DNA
(人类样本可以低至
5ng
);
浓度:
≥
1 ng/
μ
L
;
纯度:
OD260/280= 1.8 -2.0
;